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色霉素是另外的一种玻片染色技术,可用于检测精子染色质浓集异常。CMA3是与富含GC序列特异性结合的荧光染料,被认为同鱼精蛋白竞争性结合DNA,因而染色的程度与成熟精子中鱼精蛋白的水平相关。总的来说,最常用的评价精子染色质结构的技术为SCSA、AO和TB实验,后两者容易开展,但与前者相比,劳动量大且在观察者间和观察者内部存在变异。精子DNA碎片的直接评估方法这类检测方法中最常用的为原位缺口平移分析末端转脱氧核苷酰酶介导的dUTP缺口标记分析( TUNEL)和单细胞凝胶电泳分析(COMET ),其基本原理。缺口平是使用荧光显微镜检测的一种相对简单的技术,反应体系中加入一定量的生物素标记的单链DNA片段,在DNA聚合酶I的催化下与模板链结合。TUNEL分析采用末端转脱氧核苷酰酶催化的反应,可定量检测双链DNA断裂情况。TUNEL结果可以使用明视场显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪分析。一些报告已经显示人精子DNA断裂碎片的增加可对辅助生殖技术的成功率造成负面影响。这些检测方法均为特异性检测。


没有三胞胎或更多胞胎出生结果,仅发生3.8%。然而,在人数更多的年龄介于32~37岁之间且出现七个或七个以上尺寸卵泡的患者中,并未发生三胞胎妊娠和出生情况。对于年龄小于岁且出现七个或七个以上尺寸大卵泡的患者,其三胞胎或更多胞胎出生率为18.8%,并且当雌二醇水平大于等于时,大于的为四胞胎或更多胞胎妊娠。所有的四胞胎和更多胞胎着床结果发生于雌二醇浓度大于等于情况下。如果将年龄小于32岁且出现七个或七个以上尺寸大于等于卵泡患者的治疗周期取消的话,将取消34%的治疗周期,但能避免76%的发生,且剩余周期的率为6%。如果将年龄介于32~37岁之间出现七个或七个以上尺寸大于等卵泡且雌二醇水平大于等于1000pg/ ml患者的治疗周期取消的话,将取消16%的治疗周期,但能避免80%的发生,且剩余周期的率将小。无需消除年龄大于等于38岁患者的治疗周期。为了避免所有的发生,需要取消78%的年龄小于患者的治疗周期,以及取消年龄介于患者的治疗周期。那些出现七个或七个以上尺寸大于等于10mm排卵前卵泡的患者被认为发生的风险最大,当同时考虑患者年龄和雌激素水平取消这些患者治疗周期时,将周期被取消,而不是之前进行过的促性腺激素治疗周期数对的影响。


虽然彗星试验在原理上比较简单,但是将该方法应用于精子的检查并不是那么容易,因为利用凝胶电泳技术检测DNA损伤的彗星实验。在DNA提取并电泳后,损伤的DNA "像一个"彗星"。显微视野下的动态视频图像转移到计算机后,可以利用专门的软件来分析DNA碎裂的水平。其中用于评价的一个指数为尾距(彗尾长度(tail length , TL)和彗尾DNA百分含量的乘积彗尾密度(tail density , TD ))。尾距可以分为三个水平,即:轻度、中度和重度,分析结果分别给出三者的百分比打开高度致密的精子核,只有这样在电冰时DNA才能释放出来。这就需要去垢剂、酶(RNase和(或)蛋白酶K ),和(或)二硫键还原剂等高效的化学试剂的处理,这样才能导致DNA的断裂。此外,精子DNA的可染性是动态的,随着精子DNA的打开以及与其交联蛋白(鱼精蛋白)的降解和去除,精子DNA染色性逐渐增加。因此,直接比较留在精子(彗星)头部和运动到彗尾中DNA的量比较困难。


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