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ROS诱导的线粒体膜的氧化损伤可以启动细胞凋亡,线粒体膜损伤后可以导致细胞色素C的释放,继而激活caspases家族。过多的OS可以通过灭活caspases酶的级联效应来终止调亡。抗氧化剂也可以抑制或者促进细胞凋亡。在不育症男性的精液中可以检测到高水平的细胞色素C,这也间接地反映了高水平的ROS造成线粒体的显著损伤。不育症男性ROS的水平与凋亡呈正相关,而与常规精液参数呈负相关。精液中存在凋亡标记与WHO精液参数包括精子畸形指数之间关系的有关研究报道凋亡和男性不育有报道显示成熟精子细胞表达不同的凋亡晚期相关细胞损伤的标志分子,虽然精子细胞缺少转录活性,且仅有少量的细胞质(187,188)。外化磷脂酰丝氨酸(PS)活化的caspase -3,线粒体膜电位完整性(MMP)丧失,DNA断裂和膜结合的死亡受体Fas是不同程度的表达在精液中精子凋亡的末期标志。
男性性功能障碍是常见的临床问题,美国18~59岁的男性中高达31%的人群受累。虽然勃起功能障碍是公众关注的首要问题,这很大程度上是因为它存在有效的治疗药物和广泛的广告宣传,而实际上射精功能障碍是男性性功能障碍中最普遍的问题,受累人数约为患者的4倍。涵盖了多种情况,包括早泄、不射精和逆行射精。虽然受累人数较多,但对的研究和理解较少,仍无法达到与治疗成功率相当的水平。男性的性反应周期由四个阶段组成:性欲望期、性唤起期(阴茎勃起)、性高潮期(射精)和性消退期。射精过程实际上包含泌精和射精两个阶段,在性高潮时依次发生。泌精阶段包括精囊腺、前列腺、输精管壶腹、 腺分泌的液体以及通过附睾、输精管输送来富含大量精子的附睾液,共同形成精液汇集于尿道的前列腺部。泌精过程主要受到交感神经系统的控制,脊髓,的交感传出神经纤维形成腰交感神经节,继而投射到上腹下神经丛。突触后肾上腺能纤维支配前列腺、输精管和精囊腺。射精过程是在坐骨海绵体肌和球海绵体肌等多个会阴部肌肉的节律收缩下将精液经尿道喷射出尿道口。射精相关肌肉由来自。低神经的阴部神经运动支控制。射精时膀胱颈关闭,同时尿道外括约肌松弛,以防止精液逆流入膀胱内。
在精液中和处理后的精子中检测表达调亡标志物的精子可采用多种技术,包括:
■采用小鼠抗人PS的单克隆抗体检测外化的PS。
■采用荧光标记的caspase抑制剂检测活化的caspase -3, caspase抑制剂可以穿透细胞且无细胞毒性,它能与caspase -3共价结合激活caspase -3。
■利用亲脂性阴离子染料(5,50,6,60- tetrachloro -1,10,3,30- tetraethylbenzimi - dazolyl carbocyanine chlo - ride)检测精子MMP的完整,染色质断裂。
■细胞膜结合的死亡受体Fas和p53。