三代试管婴儿助孕

卵子是一个有微绒毛被覆的球状细胞。精子的头部像一个扁平的盘子，厚度小于卵子微绒毛间隙。精子以一种角度穿透透明带达到PVS后，头部很快附着在卵质膜的微绒毛上，然后以其赤道段和顶体后区接触卵微绒毛，精子尾部作强烈的摆动，卵的质膜、胞质和核物质整体在PVS中转动。此后，次级**借助微绒毛内肌动蛋白、收缩蛋白和肌球蛋白的作用，将精子全部拖入胞质，此后发生精卵融合，精卵融合后形成合子（zygote）。精卵融合的分子机制尚不清楚，研究表明其可能是由特殊的蛋白分子介导的。来源于精子头部的两种膜蛋白，一个是PH20，也叫SPAM1，参与透明带的结合；另一个是PH30，又叫受精素（fertilin），参与精卵的融合。受精素是蛋白大家族成员，它可以与卵子质膜上的整合素结合，激活G蛋白或活化酪氨酸激酶，导致内源性Ca2+释放，使卵泡质膜内的Ca2+浓度升高，引起精卵质膜融合。未受精的卵细胞膜上包含有整合素/融合分子，可以识别精子上的纤联蛋白（fibronectin）、层联蛋白（laminin）及胶原蛋白（collagen）等，很多精子相关表面蛋白涉及与卵子的融合过程。 

它们直接测定DNA链的断裂情况，但是断裂的来源不是很清楚。在体细胞中，TUNEL对凋亡造成的DNA降解更敏感，而缺口平移认为是反映坏死的指标可以利用能与DNA结合的荧光染料对精子进行单细胞凝胶电泳结果显色，这种荧光彗星实验可以对单链和（或）双链DNA缺口损伤的程度进行定量有赖于pH值。因此，彗星实验作为一种检测DNA损伤非常敏感的手段被推荐。研究显示彗星实验的结果与TUNEL和SCSA分析具有显著的一致性。该方法操作简单，实验内部变异低，且费用低，因为彗星实验依靠荧光显微镜，该分析需要有经验的观察者来分析涂片并对结果做解释。与SCSA检测相似，彗星实验同样有效地应用于对冷冻后精子DNA损伤的评估。同时，也可以对IVF和ICSI后胚胎发育进行预测，尤其是对不明原因的不孕不育。

术后可以通过使用尿管压迫宫腔来控子宫出血。保证患者在离开医院之前恢复正常意识非常重要。镇痛药物的使用通常是达到轻度镇痛。当将尿管留置在宫腔内时强度的镇痛就尤为重要了。有些人可能会放人宫内环以防止宫腔内粘连形成。实际上，其他一些医生可能会选择什么也不放。为了加速上皮化和减少宫腔粘连的风险通常会在术后进行激素治疗。通常给予的雌激素为结合雌激素，之后加用孕激素如醋酸甲羟孕酮。激素治疗完成并撤退性出血后，通常要进行三维超声下的来评估宫腔情况以评价宫腔镜手术的效果。如果宫腔情况好，则患者就可以准备妊娠了。一旦妊娠，相对于频繁的阴道超声来仔细监测宫颈长度来说，考虑行宫颈环扎更好一些。妊娠准备应推迟至术后两个月，因为术后的宫腔镜检查及活检表明术后8周宫腔才能恢复至正常。

色霉素是另外的一种玻片染色技术，可用于检测精子染色质浓集异常。CMA3是与富含GC序列特异性结合的荧光染料，被认为同鱼精蛋白竞争性结合DNA，因而染色的程度与成熟精子中鱼精蛋白的水平相关。总的来说，最常用的评价精子染色质结构的技术为SCSA、AO和TB实验，后两者容易开展，但与前者相比，劳动量大且在观察者间和观察者内部存在变异。精子DNA碎片的直接评估方法这类检测方法中最常用的为原位缺口平移分析末端转脱氧核苷酰酶介导的dUTP缺口标记分析( TUNEL）和单细胞凝胶电泳分析（COMET )，其基本原理。缺口平是使用荧光显微镜检测的一种相对简单的技术，反应体系中加入一定量的生物素标记的单链DNA片段，在DNA聚合酶I的催化下与模板链结合。TUNEL分析采用末端转脱氧核苷酰酶催化的反应，可定量检测双链DNA断裂情况。TUNEL结果可以使用明视场显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪分析。一些报告已经显示人精子DNA断裂碎片的增加可对辅助生殖技术的成功率造成负面影响。这些检测方法均为特异性检测。