亲子鉴定样本溶血对电泳图谱的干扰如何消除？

血缘关系的认定，从古至今始终是人类社会关注的核心议题。在当代科学技术的发展推动下，亲子鉴定已从传统的伦理判断，转变为集精密性、规范性和法律效力于一体的专业技术体系。其本质在于对生命最基础的遗传物质——DNA——进行科学严谨的比对分析。这不仅是一项专业的实验室检测工作，更是一套完整严密的操作规程，从样本采集的初始环节到最终鉴定报告的正式出具，每个步骤都直接影响着检测结果的精确性和结论的客观公正性。

一、亲子鉴定核心技术原理

现代亲子鉴定主要基于DNA分型技术，其核心在于比对分析个体间特定遗传标记（STR位点）的匹配程度。

人类遗传基础：

除同卵**外，每个人的DNA序列都具有独特性。子女的遗传物质一半源自生物学父亲，一半来自生物学母亲。

STR位点解析：

即短串联重复序列，指DNA上特定区域存在的重复碱基序列（如"AGAT"重复多次）。不同个体在同一STR位点上的重复次数往往存在差异。

分型检测技术：

通过聚合酶链式反应（PCR）对样本DNA中的特定STR位点片段进行扩增，再运用毛细管电泳等技术精确测定各STR位点的片段长度（即重复次数），从而构建个体的DNA遗传图谱。

亲缘关系判定标准：

将被检测儿童（C）的DNA图谱与假定父亲（AF）和/或假定母亲（AM）的图谱进行比对分析。在每个检测的STR位点上，孩子必须继承一个来自生父的等位基因和一个来自生母的等位基因。通过统计学方法计算亲权指数（PI）和累积亲权指数（CPI），最终得出亲权概率（RCP）。通常要求RCP≥99.99%才能确认亲子关系。

二、标准化技术操作流程

（一）样本采集

1、人员准备：

核对身份（司法鉴定需验证原件），签署知情同意书（司法鉴定需按手印）。采样人员需佩戴手套，必要时戴口罩、帽子。

2、样本采集方法：

口腔拭子（推荐首选）：

被采样者清水漱口后，用无菌棉签在口腔内壁旋转刮擦20-30次，同法采集另一侧。将棉签晾干后放入纸质信封，标记信息。

静脉血（司法鉴定常用）：

医护人员抽取2-5ml EDTA抗凝血，颠倒混匀后冷藏保存。

血痕样本：

采血针刺破指尖，滴3-5滴血在采血卡上自然晾干后封装。

特殊样本：

毛发需带毛囊5-8根；烟头、口香糖等需提前咨询机构要求。

3、样本封装：

独立包装，标记编号、姓名等信息。司法鉴定样本需当场封存确认。

（二）样本保存与运输

口腔拭子/血痕卡：常温避光保存，一周内送检。静脉血需2-8℃冷藏，24-48小时内送达。特殊样本按机构要求保存运输。

（三）实验室检测

1、样本接收登记：核对信息，异常情况联系委托方。

2、DNA提取：使用裂解液消化细胞释放DNA。

3、DNA质检：检测浓度和纯度。

4、PCR扩增：特异性扩增STR位点。

5、STR分型检测：毛细管电泳分析DNA片段。

6、质量控制：设置阴性/阳性对照，严格分区操作。

（四）数据分析与亲权关系计算

1、数据审核：技术员和审核员双重检查基因图谱质量、分型判读准确性、对照结果是否正常。

2、三联体分析（孩子+母亲+假定父亲）：

首先比对孩子的每个STR位点，确定其生父来源的等位基因（排除来自母亲的等位基因后）。

检查假定父亲（AF）是否携带该生父基因。如果AF在某个位点上不携带孩子必需的等位基因，则称为“排除”。

计算每个符合遗传规律的位点的亲权指数（PI）。PI=X/Y。其中：

X：AF提供孩子生父基因的概率。

Y：随机无关男子提供孩子生父基因的概率（该基因在人群中的频率）。

3、二联体分析（仅孩子+假定父亲）：

直接检查孩子每个位点上的两个等位基因，AF是否至少携带一个。

计算PI时，需考虑孩子生父基因可能来源于AF或母亲两种情况。

4、累积亲权指数（CPI）计算：将所有检测的STR位点的PI值相乘，得到CPI值。CPI值越大，支持AF是孩子生父的证据越强。

5、亲权概率（RCP）计算：RCP=CPI/(CPI+1)100%。这是支持亲子关系的统计学概率。

6、判定标准：

支持存在亲子关系：所有检测的STR位点均符合遗传规律，累积亲权指数（CPI）≥10000（对应RCP≥99、99%）。这是司法部和行业通用的认定标准。

排除亲子关系：在三个或三个以上独立的STR位点发现不符合遗传规律的现象（即排除），即可得出排除结论。

无法得出结论：极少数情况（如基因突变、近亲干扰）下，不符合位点少于3个且CPI未达认定标准，需增加检测位点或补充母亲样本。

（五）报告出具

1、报告内容：

鉴定机构名称、许可证号。

委托方信息、委托人。

被鉴定人信息（姓名、性别、出生日期/年龄、关系）、样本类型、采样日期。

鉴定项目（如“三联体亲子关系鉴定”）。

检验方法（如“STR分型检测”）。

检验使用的试剂盒名称、检测的STR位点列表。

被鉴定人的STR分型结果（列表或图谱）。

分析说明：明确表述是否符合遗传规律，是否存在排除位点，给出CPI值和RCP值（支持关系时）。

鉴定意见：清晰结论（如“支持XX是XX的生物学父亲”或“排除XX是XX的生物学父亲”）。

鉴定人、复核人签名，授权签字人签名（司法鉴定报告需执业证号）。

鉴定机构盖章（司法鉴定专用章）。

报告日期。

声明（如“本鉴定仅对送检样本负责”、“解释权归本机构所有”）。

2、报告审核与签发：由具备资质的授权签字人进行最终审核并签发。

三、注意事项

1、资质要求：司法鉴定需选择具有法医物证鉴定资质的正规机构。

2、样本要求：确保样本真实可靠，司法鉴定须现场采样。

3、质量控制：严格防控污染风险，确保样本质量达标。

4、特殊情况：

基因突变可能导致个别位点异常

近亲关系可能干扰结果判断

STR技术无法鉴别同卵**

5、报告解读：

CPI/RCP为概率性结论

建议咨询专业机构解读结果

亲子鉴定是严谨的科学检测过程，需选择正规机构确保结果准确可靠。