因为我和我老婆想要个助怀孕的原因,这两天一直在了解辅助试管。因为做试管婴儿老婆要受很多罪,所以没太考虑,然后了解到有项技术叫XY子分离术,所以就想尝试一下,但是在网上看到说用上游法分离Y子的方法不靠谱,所以想问一下通过上游法能够分离出携带Y染色体的子吗?
通过上游法是可以有效分离Y子和X子的,这种方法主要利用了XY子的体型不同的原理,因为X子质量重,而Y子体积小质量轻游动速度快,所以通过将男的子放在装在培养液的试管中时,Y子就会游到上层,同时X子也会沉在底部,因此这种方法是有效的,但是并不能完全分离。
Y子的质量比X要重
上游法也分为直接上游法和沉淀上游法,一般对于液常规大致正常的液标本建议用直接上游法进行分离,大致流程如下:
1.充分混匀液样本;
2.在10ml的圆底试管中吸取2ml的培养液,然后将约1.5ml液化后的液小心地加到试管底部,注意培养液与液之间有一界面,加液时应小心不要扰乱这个界面;
3.试管静置于室温下10~120min;
4.吸取含活动子的上层培养液,离心200g×5min;
5.弃上清液,再加入2ml培养液,离心200g×5min;
6.弃上清液,留沉淀待用。
通过直接上游法,可以使回收到的子活动率明显高,正常形态子百分率增加,缺点是子的回收率低,子密度低和活动力差的标本不适用。 因为形态异常子的比例是随着上游时间的增加而增加的,而子密度会持续上升,因此时间延长能使形态异常的低活力子也上游到顶端,上游时间应根据液的参数而适当调整。
而沉淀上游法适合因抗子抗体而将液收集在含血清培养液者,逆行射者,液黏度过大者,液体积较少者,能够有效高子的质量。
上游法主要利用活动子的游动能力,即能游过液体界面进入不同的培养液,从而与死精子、活动力差的子、凝集子、畸形子、红、白细胞及其他有害成分及杂质自行分离,由于纯物理作用而使子重新分布,故理论上不影响子的生物学特。
直接上游法可收集90%以上的高活动率子,同时对形态正常的子也起到作用。有资料表明,直接上游90min后能平均减少41%的形态异常子,也有研究表明上游90min后培养液中的子密度不会再高,一般65min左右密度达到峰值。